ELISA可用于测定抗原,也可用于测定。然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
特点编辑一、、灵敏、特异的;二、稳定的重复性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;四、适用、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;五、节省实验经费。
常用的是40孔聚凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,测试盒生产,据此判明其吸附性能是否良好。(2) 包被(或抗原)的选择:将(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,测试盒供应商,一般多采用4℃ 18~24小时。
做好对照正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,测试盒,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,测试盒报价,说明有非特异性反应,可采用羊、兔或BSA等封闭。实验条件的选择在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚、聚、聚丙酰胺和纤维素等。
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